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頂空氣相色譜系列講座（17）  
人體血液中一氧化碳的分析——定量分析4  

二、氯化鈀法

原理——碳氧血紅蛋白與酸作用，釋放出CO氣體，它能定量地與氯化鈀作用。然后用紫外分光光度法測定反應(yīng)后氯化鈀溶液的濃度，從剩余氯化鈀的量可求碳氧血紅蛋白的飽和率。

操作——1. 取擴散吸收池一個，在內(nèi)槽中加入 3.0mL C（PdCl2 = 0.0025）mol/L溶液，在外槽一側(cè)加1.0mL C（H2SO4=1.8）mol/L溶液

              2. 取檢材血0.5mL置外槽另一側(cè)，立即蓋嚴(yán)蓋子，輕輕旋轉(zhuǎn)傾斜使硫酸與血混合，如室溫<5℃需水浴上稍加熱，放置1~2小時

3. 取出內(nèi)槽中的氯化鈀溶液，過濾，濾液轉(zhuǎn)入50mL容量瓶中，用0.1mol/L鹽酸洗滌內(nèi)槽三次，洗液濾入容量瓶中，然后用0.1mol/L鹽酸稀釋至刻度，混勻后放置待測。

4. 取容量瓶中的清液置石英杯中，以0.1mol/L鹽酸作參比， 278nm處測紫外吸收。

5. 分別吸取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5和3.0mL（ PdCl2 =0.025）mol/L溶液置50mL容量瓶中，用用0.1mol/L鹽酸稀釋至刻度，同上平行操作分別測紫外吸收，得到氯化鈀的標(biāo)準(zhǔn)曲線。




計算——將檢血的氯化鈀吸收值與標(biāo)準(zhǔn)氯化鈀溶液的吸收值作比較，求出剩余氯化鈀容量，再求出相應(yīng)的CO容量（見相關(guān)值表），然后根據(jù)檢材血的血紅蛋白含量計算碳氧血紅蛋白飽和率。

氯化鈀與一氧化碳相關(guān)值表

剩余 PdCl2（ml/50ml） CO（ml/100ml）   


碳氧血紅蛋白計算公式如下：

   HbCO% =     CO容量（ml/100ml）×100 ÷  血紅蛋白（g/100ml）×1.35



注意——1. 此法對新鮮檢材血可不考慮干擾問題，如是腐敗檢材血，可用醋酸鉛-醋酸

          溶液代替1.8mol/L硫酸溶液，以除去硫化物的干擾。

              2. 醋酸鉛-醋酸溶液配制，取10mL冰醋酸用水稀釋至100mL ，加醋酸鉛至飽

          和。

              3. 為保證檢材血和標(biāo)準(zhǔn)系列血中的血紅蛋白的濃度一致，平均校正因子為

          1.35